REAGEN™大肠杆菌O157:H7酶联免疫反应测试盒
RNB93002
1．概述
REAGEN™大肠杆菌O157:H7酶联免疫检测试剂盒是用来检测食品和饲料中大肠杆菌O157:H7的含量。大肠杆菌O157:H7是肠杆菌家族的一种革兰氏阴性菌，“O”指的是菌体抗原，“H”指的是鞭毛抗原，这是大肠杆菌数以百计血清型中的一种。大多数片段是无害的，通常存在在哺乳动物的肠中。这个O157:H7片段能产生志贺祥毒素，是肠出血性大肠杆菌（EHEC）级的一个成员，会导致严重的疾病，感染上肠出血性大肠杆菌的人会出现肠出血症和溶血性尿毒综合症。污染致病原主要存在于：生的细纹牛肉、未经巴氏消毒的牛奶、未经处理的水、果汁、嫩芽、生菜和腊肠中。
检测食品中大肠杆菌O157:H7既费力又费时。REAGEN™大肠杆菌O157:H7酶联免疫检测试剂盒为国家管理部门、食品生产商、质检部门提供了方便有效的方法，检测水平为105细胞/ml。
2．试剂盒原理
该试剂盒基于酶联免疫检测原理，大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体包被在微孔内。分析过程中，如果样品中有大肠杆菌存在，当加入样品时，即可与单抗结合，在孔中加入适当的培养液可以快速增菌。酶标记的二抗与板孔中包被的一抗结合，加入底物后颜色的深浅与样品中大肠杆菌O157:H7的含量相关。
3. 试剂盒组成
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试剂盒组成
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规格
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保存
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抗体包被的酶标板
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12×8 孔
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2-8°C
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1×阴性对照
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1×1ml
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-20°C
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1×阳性对照
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1×1ml
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-20°C
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50×HRP- 二抗
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3×50ml
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-20°C
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二抗稀释液(
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1×20ml
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2-8°C
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20×浓缩洗液
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1×30mL
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2-8°C
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终止液
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1×20mL
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2-8°C
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TMB底物
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1×10mL
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2-8°C
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4. 检测限：105细胞/ml
5. 交叉反应：
本试剂盒可检测大肠杆菌O157:H7抗原
6．其他需要而本试剂盒未提的设备或材料
ü 酶标仪（450nm）
ü 恒温培养箱
ü 漩涡振荡器
ü 移液器(10、20和100mL，1mL各一支)
ü 多道移液枪：50-300ml（可选择）
ü mTSB培养基：含有10g/L酪蛋白氨基酸和1.5g/L磷酸氢二钾的胰化酪蛋白大豆培养基
7.注意事项
实验前请阅读以下文字，以保证获得最佳实验效果。
ü 样品中含有大肠杆菌，请小心使用。
ü 进行样品准备过程中，操作人员必须有好的微生物操作技能。
ü 不要使用过期的试剂盒。
ü 不同批次的试剂盒不要混用，确保二抗正确稀释。
ü 尽量保持室温20-25℃，避免在通风口操作防止温度过低，过热和/或者蒸发。不要在阳光直射下实验，防止过热及蒸发。在孵育期间，如果工作台温度过低，应该铺垫纸巾或其他物料。
ü 水质量很重要，确保使用蒸馏或者去离子水。
ü 加入样品或者试剂到空的微孔板时，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接触。
ü 孵育时间的计算越规范越好，保持添加标准品的一致性，先添加标准品后添加样品。
ü 从低浓度到高浓度地添加标准品，降低影响标准品曲线质量的风险。
ü 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中，冷藏保存。