化学发光免疫分析CLIA是继酶免分析技术(EIA)、放射免疫分析技术(RIA)、荧光免疫分析技术(FIA)、时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)之后新兴的免疫分析技术,检测速度快、灵敏度高、特异性高且自动化程度高。
不同化学发光试剂区别:
吖啶酯并不是CLIA中唯一的化学发光试剂,还有鲁米诺、异鲁米诺、金刚烷二氧环乙烷、三联吡啶钌等。
鲁米诺,需要过氧化物酶如POD或HRP的催化,对反应环境的pH要求以及温度要求较高;异鲁米诺较鲁米诺发光体系发光效率低,但其苯环上的氨基可以进行官能团取代,提高发光效率并且方便标记。
金刚烷二氧环乙烷,金刚烷体系需要碱性磷酸酶参与,同样易受环境pH值、温度等因素影响。
三联吡啶钌是电化学发光体系,仪器设备的性能要求较高,清洗条件要求苛刻。
而吖啶酯属于直接化学发光,不需要酶的催化,且可以直接标记蛋白、抗体、核酸等。具有背景低、标记工艺简单、标记后光量子产率不减少、发光时间短、稳定性好等优点,目前综合优势较大。
光泽精,同样含有吖啶结构,与吖啶酯较类似,早期使用较多;还有过氧草酸酯等,使用较少。
吖啶酯化学发光特点:
吖啶酯化学发光为闪光型,在化学发光免疫分析领域与其它技术相比具有优势,吖啶酯化学发光在加入启动剂0.4s后发射光强度达到最大,半衰期为0.9s,2s内发光基本结束,可以实现快速检测。吖啶酯标记工艺简单,标记反应一步完成,发光过程只需要在碱性条件下,经过氧化氢氧化就可以直接发光,不需要其它发光催化剂。
为了使吖啶酯适应不同的蛋白质、抗体、核酸的研究实验,可进行官能团的取代使其性能更好,比如吖啶磺酰胺、便于标记的NHS酯等。根据不同的官能团取代,德晟研发生产的吖啶酯目前已有6种。