上海武昊经贸有限公司  

[标本的采集与保存]

1、 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4^oC过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20^oC或-80^oC保存，但应避免反复冻融。

2、 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8^oC 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20^oC或-80^oC保存，但应避免反复冻融。

3、 组织匀浆：

1） 取适量组织块，于预冷PBS（0.02mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，称重后备用（组织块较大需先剪碎后再匀浆）；

2） 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL预冷PBS进行充分研磨，该过程需在冰上进行（有条件实验室可选用机器匀浆）；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理（超声破碎过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次）。

3） 将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟，留取上清即可检测。

4、 细胞培养上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20^oC或-80^oC保存，但应避免反复冻融。

注意：

1、 以上标本均需密封保存，4^oC保存应小于1周，-20^oC不应超过1个月，-80^oC不应超过2个月。

2、 标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

3、 标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。

     [标本处理]

1、 Uscn,Inc.只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。

2、 实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

3、 若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。

4、 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致  ELISA实验结果偏差。

5、 若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素 较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。

6、 某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。

7、 建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏 差。