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DyLigh™系列荧光标记是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料,由于具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度,更高的光学耐受性(抗淬灭性)、对pH不敏感、分子较小而渗透性更好的优势,越来越受到科研客户的喜爱。DyLight™种类齐全,如Dylight 405是蓝色荧光,替代Alexa 405;DyLight 594是绿色荧光,可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488;完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549;替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594;Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)则是更强的红色荧光;另外,Dylight还有适配Odyssey系统的近红外和远红外二抗Dylight 680和DyLight 800。
图 1:HEp-2细胞使用ANA一抗(BIO-RAD),并比较使用不同发色团的二抗标记。荧光显微镜下观察ProLong Gold (Invitrogen)封片的细胞。Nikon LABOPHOTNikon 荧光显微镜连接D-70 DSLR 摄像机,100×曝光拍摄的图片。图中Alexa 594和DyLight 594标记的细胞1秒曝光所拍,Texas Red标记的细胞2秒曝光所拍。其它封片剂处理的细胞获得类似的结果。 |
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图2、以时间为横坐标,初始荧光强度的百分比为纵坐标绘制的荧光强度图表,HEp-2细胞以ANA(Bio-Rad)和各种红色荧光标记的山羊抗人IgG(H+L)的二抗标记。细胞分别用ProLong Gold(左)、Vectashield(中)、含N-propyl gallate的 PBS-90%甘油封片(右)。由上图所示,ProLong Gold 封片的细胞经DyLight 594标记显色,耐光性强于Texas Red,与Alexa 594相当。Vectashield封片的细胞用DyLight 594和Alexa 594标记,耐光性弱于Texas Red。然而含N-propyl gallate的PBS-90%甘油封片的细胞DyLight 594标记抗体,耐光性强于其他标记抗体。 |
DyLight 594标记的抗体荧光亮度明显强于Alexa 594标记抗体。相比较Texas Red而言,不仅更亮,而且具有更好的水溶性。与DyLight 549、Cy3或TRITC标记物相比,它与绿色标记染料表现出更大的色差;就其光学稳定性,DyLight 594在不含有抗淬灭剂的条件下,远较Texas Red稳定,与Alexa594相当;在含有某些抗淬灭剂的情况下,DyLight 594同样表现优异。总之,在可见光谱的深红色区域内,DyLight 594标记二抗是所有免疫荧光实验中最好的选择。另外,DyLight荧光标记的二抗比传统的FITC/Cy2以及Alexa 488具有更高的性价比。
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品名 | 品牌 | 货号 | 规格 |
DyLight 594 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) | EarthOx | E032410 | 100μl/500μl |
DyLight 594 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) | EarthOx | E032420 | 100μl/500μl |
DyLight 594 AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG(H+L) | EarthOx | E032430 | 100μl/500μl |
DyLight 594 AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L) | EarthOx | E032440 | 100μl/500μl |
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