吖啶酯(NSP-SA-NHS)Cas199293-83-9及其相关化合物已被证明是非常有优势的化学发光标记物,其稳定性、活性和敏感性超过了某些放射性同位素。吖啶酯能与含有一级氨基的蛋白发生反应。在碱性条件下,NHS作为离去基团被取代,蛋白质与吖啶酯形成稳定的酰胺键。反应完成后,多余的吖啶盐通过脱盐柱除去。
在存在碱性过氧化氢时,吖啶标记的蛋白不需要酶催化可自行发光。具体发光原理是在碱性过氧化氢溶液中,吖啶酯受到过氧化氢离子的进攻,生成一个有张力的不稳定的二氧乙烷,进一步分解成CO2和电子激发态的吖啶酮,当吖啶酮回到基态时发出最大吸收波长430nm的光子。
这个发光过程是十分短暂(整个过程的发生小于2秒),触发方案必须增加内部光度计和光子探测器;另外,也可以使用配备自动进样器的多功能酶标仪进行发光数据采集。蛋白质,多肽,抗体,核酸都可以用本产品进行标记。吖啶酯在碱性过氧化氢的激发下快速发光,因此通过收集光子可以检测到标记化合物。
主要用于:化学发光及免疫分析、受体分析、核酸及多肽检测等研究。
储存条件: ﹣20℃,避光
运输条件: 2-8℃,避光
1.配制说明
标记缓冲液:0.2M NaHCO3 (pH=9.0);
标记终止缓冲液: 10% 赖氨酸 0.2M NaHCO3 (pH=9.0)溶液;
脱盐纯化缓冲液:0.1M Na2HPO4-NaH2PO4 (pH=6.5);
吖啶酯发光液:(0.01~0.1M) NaOH+0.05% H2O2 。
2. 计算标记所用抗体(蛋白质)和吖啶酯的量:
通常设定摩尔比n(抗体): n(吖啶酯)=1:10~1:50,具体需根据氨基酸组分进行摸索调整;
配制2.5mg/ml 吖啶酯-DMSO母液,注意玻璃器皿盛放并避光;
使用0.2M NaHCO3(pH=9.0) 溶液配制0.1~0.5 mg/ml 抗体反应液 。
需要注意的是,吖啶酯标记的蛋白可以在酸性缓冲液中4℃避光存储(注意补加叠氮钠等防腐剂),如果储存效果不佳,则请避光保存于-20℃或者-80℃。德晟专业生产化学发光试剂、化学发光底物和酶的显色底物以及体外诊断试剂。我们还可以接受定制合成服务,欢迎前来咨询订购!