█ 噬菌体展示技术
噬菌体展示是一种广泛使用的实验室技术,它使用噬菌体将蛋白质与其各自的遗传信息相关联,以研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-肽和蛋白质-DNA 相互作用。在这项技术中,编码抗体的基因片段与编码噬菌体外壳蛋白的基因融合,使噬菌体在其外部“展示”蛋白质。
噬菌体展示最有价值的优势之一是变异抗体基因的巨大多样性。数百万甚至数十亿重组噬菌体(最常见的噬菌体是 M13、T4 和 T7 噬菌体),每个噬菌体在其表面上展示不同的抗原结合域,被称为噬菌体展示文库。与传统的杂交瘤方法相比,噬菌体展示库在发现用于治疗和诊断应用或研究的新型抗体方面具有巨大的优势。
泰克的噬菌体展示文库包含超过 500 亿种不同的完全人源抗体,让您能够选择所需的具有高亲和力和特异性的抗体。此外,泰克生物可以使用GST pull-down或CO-IP策略检测展示的蛋白质与其他分子之间的相互作用或分离特定目标。
█ 抗体文库构建
抗体库是由抗体的基因组信息编码可变区构建的,可以是人浆细胞和来自免疫动物的脾细胞。基本上,以下两种策略用于构建展示抗体文库:使用轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)编码基因的随机组合来构建这些文库;另一种方法是通过扩增一个或多个个体的可变基因序列来设计人VL和VH序列。
构建一个成功的抗体库的关键是足够的多样性,这对于筛选任何给定抗原的抗体至关重要。通过 DNA 操作,数以百万计的基因变体被组装起来,以 Fab 或 scFv 抗体片段的形式展示在噬菌体表面。